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細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題
發(fā)布時(shí)間： 2024-01-18 點(diǎn)擊次數(shù)： 1306次三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題：
細(xì)胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)基是不是必須加雙抗？血清在使用之前是不是一定要滅活？往培養(yǎng)基里加細(xì)胞因子又是什么操作？
要不要加雙抗？
在培養(yǎng)基中添加抗生素是一種常見(jiàn)的操作，其主要作用是抑制或殺死培養(yǎng)物中的某些細(xì)菌或真菌，從而避免它們對(duì)目標(biāo)細(xì)胞的干擾和污染。
在培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，選擇適當(dāng)濃度和種類(lèi)的抗生素，可以有效地消除或減少雜菌、污染菌或其他不需要的微生物，保證培養(yǎng)物的純度和穩(wěn)定性。
同時(shí)，添加抗生素還可以用來(lái)篩選或檢測(cè)耐藥性菌株，評(píng)估其對(duì)抗生素的敏感性和耐受性。
但是，添加抗生素并不能確保你的細(xì)胞一定不被微生物污染，因操作不當(dāng)造成污染的還是會(huì)被污染的。
并且，一旦細(xì)胞被污染，抗生素也只能起到一定的抑制延緩作用，并不能全部殺滅微生物。而且，長(zhǎng)期添加抗生素的話(huà)，還容易掩蓋培養(yǎng)環(huán)境的真實(shí)情況。
因此 ，雖然在培養(yǎng)基中添加抗生素是常見(jiàn)操作，但并不是必須操作。
細(xì)胞因子是什么？
除了抗生素外，培養(yǎng)基中還可以添加細(xì)胞因子，以模擬體內(nèi)環(huán)境和調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。
細(xì)胞因子是一類(lèi)多肽分子或蛋白質(zhì)，由細(xì)胞自身或其他細(xì)胞產(chǎn)生，并通過(guò)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑影響目標(biāo)細(xì)胞的增殖、分化、存活、遷移等過(guò)程。
在細(xì)胞培養(yǎng)中，添加適當(dāng)濃度和種類(lèi)的細(xì)胞因子，可以促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化，提高細(xì)胞存活率和功能表現(xiàn)。
例如，添加表皮生長(zhǎng)因子（EGF）可以促進(jìn)表皮細(xì)胞增殖和修復(fù)；添加肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）可以促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和再生；添加白細(xì)胞介素-2（IL-2）可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖和活化等。
此外，添加某些細(xì)胞因子還可以誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定類(lèi)型的成體細(xì)胞，如添加神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（NGF）可以誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元。
血清要滅活才能用？
血清中含有生長(zhǎng)因子可促進(jìn)細(xì)胞繁殖，含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞貼壁，同時(shí)還有一種特殊的活性能抵抗胰蛋白酶的消化作用。
血清內(nèi)含有豐富的礦物質(zhì)、酯類(lèi)和激素。最常見(jiàn)的血清包括：小牛血清、胎牛血清、成年馬血清等。其中胎牛血清對(duì)培養(yǎng)要求高的細(xì)胞系。
血清來(lái)源于動(dòng)物， 因此必定存在批次間的差異，且生產(chǎn)過(guò)程中由于工藝流程的不同，哪怕是同一類(lèi)型的血清也會(huì)存在質(zhì)量上的巨大差異。
血清的滅活是將血清置于56攝氏度中30分鐘，然后再分裝成數(shù)份保存于-20攝氏度。
血清加熱的最初目的是為了免疫分析時(shí)用于滅活補(bǔ)體的，因此就有了血清使用前要滅活的說(shuō)法。
但現(xiàn)在商業(yè)化的血清產(chǎn)品，基本上出廠(chǎng)之前都經(jīng)過(guò)了滅活處理，所以一般情況下，就不需要再操作一次滅活了，除非供應(yīng)商在銷(xiāo)售時(shí)特別強(qiáng)調(diào)了要進(jìn)行這個(gè)操作。
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