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3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠
更新時(shí)間：2025-06-30
訪問(wèn)量：1902
廠商性質(zhì)：代理商
生產(chǎn)地址：美國(guó)
3D細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠
一、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、基質(zhì)膠為植物源：
A.無(wú)人畜共患病的病原菌或毒素污染
B.氨基酸序列100%人源化
C.成本低且易規(guī)模化大量生產(chǎn)
D.3D培養(yǎng)結(jié)束后基質(zhì)膠可以融化
E.4度運(yùn)輸
F.產(chǎn)品有效期2年
2、可用作醫(yī)療生物原料：
A.高安全、低過(guò)敏
B.高活性、高純度
C.最是適合人體研究
3、符合人體癌藥篩檢：
A.低成本且穩(wěn)定
B.3D癌組織培養(yǎng)系統(tǒng)
C.可用于精準(zhǔn)人體癌藥篩檢
4、滿足生物原料需求：
A.自產(chǎn)關(guān)鍵原料
B.低成本
C.降低批次差異
D.人源化原料更精準(zhǔn)
二、應(yīng)用
•三維細(xì)胞球體培養(yǎng)試驗(yàn)
•適合用于三維細(xì)胞藥物篩檢平臺(tái)
三、樣本類型
•腫瘤細(xì)胞系
四、試劑盒組分
五、使用步驟：
A、試劑制備
A 基質(zhì)膠：將A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10分鐘， 確認(rèn)*融解.
C 緩沖溶液(1X)制備： 使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無(wú)細(xì)胞培養(yǎng)液(例如：無(wú)血清 DMEM、 opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
Biozellen®3D 細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備
全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內(nèi)操作，操作步驟如下：
1. 將 24孔培養(yǎng)板放置于冰上預(yù)冷。
2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)后取 2×105~2×107 細(xì)胞與 0.5 毫升 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合，并與 0.5毫升 37℃ A 膠按照
1:1 等比例均勻混合，最終細(xì)胞密度105~107cells/mL。
注：請(qǐng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進(jìn)行試驗(yàn)，貼壁細(xì)胞應(yīng)在~80% 匯合度下培養(yǎng)。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細(xì)胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預(yù)冷的培養(yǎng)板上， 膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。
注: 測(cè)試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認(rèn)。
4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的1X C 緩沖溶液，并蓋過(guò)步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待 15分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細(xì)胞生長(zhǎng)之培養(yǎng)基溶液。
6將含有細(xì)胞的膠于 37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行7~14天的培養(yǎng)，并觀察細(xì)胞球體的形成，按正常培養(yǎng)基
更換頻率進(jìn)行更換操作。
C、溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序
小心的將培養(yǎng)基吸取移除，并用 1X PBS 進(jìn)行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過(guò)膠滴于室溫反應(yīng) 5 分鐘。
溫和的用 1毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。
將含有細(xì)胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心 10分鐘，移除上清液體并收集細(xì)胞
球體做分析。
D、收集單顆細(xì)胞準(zhǔn)備程序
在分離單細(xì)胞前，先按上述溶膠與收集細(xì)胞球體準(zhǔn)備程序進(jìn)行操作
1. 添加 trypsin-EDTA并與收集的細(xì)胞球體于 37°C 混合反應(yīng)。
2. 用 1毫升移液管混合，直到細(xì)胞體*分解。
3. 待細(xì)胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心 10分鐘，并移除上清
液體收集沉淀的單細(xì)胞做分析。
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